| 更新時間： | 2025-01-14 |
| 型 號： | |
| 所屬分類： | 病理學(xué)檢測實驗 |
| 報 價： | 80 |
服務(wù)名稱：免疫熒光染色實驗服務(wù)規(guī)格：切片價格：80收費標準/服務(wù)周期/提供結(jié)果:歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細的服務(wù)協(xié)議。更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
免疫熒光染色實驗服務(wù)
一、制片
選無自發(fā)性熒光的石英玻片或普通優(yōu)質(zhì)玻片，洗凈后浸泡于無水乙醇和乙氧基乙烷等量混合液中。用時取出用綢布擦凈。將待檢樣品如組織塊剪成適當(dāng)大小印壓于玻片上。也可采用冰凍切片或石蠟切片樣品。
二、固定
除研究細胞表面抗原或不穩(wěn)定抗原可不固定外，--般均應(yīng)固定。
固定的作用有三:
1.防止標本從玻片上脫落。
2.除去防礙抗原抗體結(jié)合的類脂，使抗原抗體結(jié)合物易于獲得良好的染色結(jié)果。
3.固定的標本易于保存，如組織切片固定后在-20%C下可保存一年而不改變其染色特性。
標本的固定原則是:
1.不能損傷細胞內(nèi)的抗原。
2.不能凝集蛋白質(zhì)。
3.不能損傷細胞形態(tài)。
4.固定后應(yīng)保持細胞膜的通透性，以允許抗體進入與抗原結(jié)合。
三、水洗
固定后以冷的0.01 Mol/L pH7 4PBS液浸泡沖洗，后以蒸餾水沖洗，防止自發(fā)性熒光。
四、染色
染色分直接染色法與間接染色法。
1.材料與試劑
(1)熒光抗體，稀釋至應(yīng)用濃度。
(2) 0.01 Mol/L pH7 .4PBS液
(3) 9份優(yōu)質(zhì)甘油加1份pH7 .4PBS液即為甘油緩沖液。甘油有減少非特異性熒光的作用。
(4)帶蓋方盤。
2. 直接染色法
(1)將固定好的玻片置于濕盤中，滴加熒光抗體染色液，以覆蓋為度，加蓋，37°C感做30min~45min.
(2) PBS沖洗3次，每次沖洗3 min,即3x3沖洗。
(3)蒸餾水沖洗。
(4)滴甘油緩沖液一滴，封片，熒光顯微鏡檢查。
3.間接染色法
(1) 檢查抗原:
①取固定標本，加已知的免疫血清，37°C孵育30 min。
②以PBS液3x3沖洗。
③再加熒光標記的抗抗體，37°C孵育30 min。
④PBS 3x3沖洗。
⑤H2O沖洗，涼干。
⑥加甘油緩沖液，封片、鏡檢。
(2)檢查抗體:
①兔疫后動物的淋巴組織涂片，自然干燥，甲醇固定。
②滴加相應(yīng)抗原液(按1: 100~1: 500稀釋)， 37°C孵育30 min.
③PBS液3x3沖洗。
④加熒光抗體，37°C孵育30 min.
⑤PBS液3x3沖洗。
⑥水洗，干。
⑦加甘油緩沖液，封片、鏡檢。
[項目開展范圍]慢病毒,腺病毒，RNAI類， 分子生物實驗，病理實驗，免疫學(xué)實驗，細胞實驗，動物實驗，蛋白組學(xué)實驗，芯片類實驗，并為廣大客戶朋友們提供課題設(shè)計指導(dǎo)、基金申請指導(dǎo)、SCI. 核心期刊等服務(wù)。
從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實驗外包及論文潤色服務(wù)，協(xié)助客戶各類實驗服務(wù)及論文潤色十余年，是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!
如果您受時間、試驗條件等限制而無法完成您的課題研究，歡迎您與我們聯(lián)系。
實驗代做服務(wù)：
WB代做 | HE染色 | 免疫熒光染色 | 蛋白相互作用分析 |
ELISA免費代檢測 | 免疫組化 | 熒光定量PCR | 番紅O固綠染色 |
流式細胞分選技術(shù) | 激光共聚焦 | 透射電鏡服務(wù) | DNA甲基化實驗 |
免疫共沉淀（Co-IP） | DNA甲基化 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
半定量RT-PCR | 分子克隆和質(zhì)粒載體構(gòu)建服務(wù) | 原位雜交（FIsh） | 石蠟/冰凍切片凋亡 |
RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀（RIP） | CCK8檢測 | 蛋白雙向(2-D)電泳 | 蛋白雙向2D-WB |
ATP/ADP檢測 | Taqman探針 | 細胞劃痕 | 基因組DNA提取 |
執(zhí)照.jpg)
