組織芯片微陣列定制技術(shù)服務(wù)
實驗技術(shù)簡介:
組織芯片(issue chip),也稱組織微陣列(tissue microarrays),生物芯片技術(shù)的一個重要
分支，組織芯片技術(shù)是將幾十至.上千個小組織切片集中于-張載片 上形成的縮微組織陣列，具有體積小、信息含量高、高效低耗和可比性強的優(yōu)點。該技術(shù)問世十年以來以其大規(guī)模、高通量、 標(biāo)準(zhǔn)化等優(yōu)點得到大范圍的推廣應(yīng)用。組織芯片與基因芯片和蛋白質(zhì)芯片一起構(gòu)成了生物芯片系列，使人類第--次能夠有效利用成百上千份組織標(biāo)本,在基因組、轉(zhuǎn)錄組和蛋白質(zhì)組三個水平上進(jìn)行研究，被譽為醫(yī)學(xué)、生物學(xué)領(lǐng)域的--次革命。組織芯片技術(shù)可以與其他很多常規(guī)技術(shù)如免疫組織化學(xué)(HC)、核酸原位雜交(ISH)、光原位雜交(FISH)等方法結(jié)合應(yīng)用，它的應(yīng)用領(lǐng)域正在不斷地拓展。
實驗操作流程:
制作組織芯片空心蠟?zāi)?/span>
利用組織芯片空心蠟?zāi)３尚湍＞撸?/span>--次成型制作組織芯片空心蠟?zāi)＃唧w操作如下:
1、將石蠟放入組織芯片制備系統(tǒng)熔蠟盤內(nèi)加熱熔化，熔蠟盤內(nèi)放入一片適當(dāng)大小的硬質(zhì)光面塑料薄板。將空心蠟?zāi)３尚涂虼罂诔缕椒庞谌巯灡P中的塑料薄板上,調(diào)整熔蠟盤內(nèi)石蠟的量，使熔化石蠟平面高出空心蠟?zāi)３尚涂蚣s2 mm。
2、將無刃陣列管針管口朝下放置于組織芯片制備系統(tǒng)加熱板上預(yù)熱(70 °C)約10 min,平穩(wěn)垂直插入上述空心蠟?zāi)３尚涂颉?/span>
3、平穩(wěn)移開熔蠟盤，室溫冷卻石蠟數(shù)分鐘，熔蠟盤中石蠟呈半凝狀態(tài)時，下壓空心蠟?zāi)?成型框活動頂板，使其貼近蠟?zāi)３尚涂颉?/span>
4、用小刀將空心蠟?zāi)３尚涂蛩闹苁瀯濍x，繼續(xù)室溫冷卻石蠟數(shù)分鐘，熔蠟盤中不再有任何能流動的液體狀石蠟。
5、將熔蠟盤放回組織芯片制備儀上加溫數(shù)秒鐘，熔蠟盤底部石蠟開始熔化時迅速整體移除陣列管針、蠟?zāi)３尚涂?、蠟?zāi)３尚涂騼?nèi)的蠟?zāi)！?/span>
6、插入陣列管針針芯，推出并去除進(jìn)入陣列管針內(nèi)的石蠟，拔除陣列管針針芯，去除蠟?zāi)３尚涂蛲獠繗埩舻氖灐?/span>
7、使用組織芯片空心蠟?zāi)０文Ｑb置，均勻拔除陣列管針， 去除蠟?zāi)３尚涂蚧顒禹敯逡约跋災(zāi)３尚涂蛑苓厷埩舻氖灐＝M織芯片空心蠟?zāi)Ｖ苽渫戤?。組織芯片空心蠟?zāi)o需從蠟?zāi)３尚涂蛑腥〕觥?/span>
制作組織芯片石蠟塊
1、目標(biāo)組織定位:組織芯片供體蠟塊常規(guī)病理切片1張，厚4μm,常規(guī)HE染色后進(jìn)行組織病理診斷閱片，在組織切片的指引下，對相應(yīng)供體蠟塊進(jìn)行目標(biāo)組織定位標(biāo)記。
2、組織芯片蠟芯取材與點樣: 將蠟塊放入適當(dāng)溫度的熱水中預(yù)熱軟化片刻，應(yīng)用組織芯片制備系統(tǒng)的芯月石蠟組織芯取樣器鉆取目標(biāo)組織柱。目標(biāo)組織柱逐-點樣于組織芯片空心蠟?zāi)Ｖ械奈恢?。用實心單針?將目標(biāo)組織柱輕輕壓平， 使其處于同-切片平面。將裝滿組織芯的蠟?zāi)Ｆ叫幸浦烈粔K薄銅板上,加熱銅板數(shù)秒至貼近銅板的蠟?zāi)Ｉ约尤刍?，迅速移除銅板，室溫冷卻數(shù)秒后去除銅板。
3、二次包埋組織芯片石蠟塊:芯片組織面朝下,將點好樣的組織芯片蠟塊連同蠟?zāi)３尚涂蚍湃胧⒂猩倭咳刍灥娜巯灡P中(熔化石蠟的深度約4 mm)，數(shù)秒種后即可肉眼觀察到熔化的石蠟浸入到石蠟組織芯與蠟?zāi)？椎拈g隙。移除熔蠟盤,將塑料石蠟包埋盒放于蠟?zāi)３尚涂蛏?用勺舀取熔化的石蠟倒入包埋中，室溫冷卻數(shù)分鐘，石蠟半凝狀態(tài)時用小刀劃離蠟?zāi)３尚涂蛑車氖?。石?凝固后，復(fù)加熱熔蠟盤移除二次包埋好的組織芯片石蠟塊。
4、去除蠟?zāi)３尚涂蛞约八芰鲜灠窈兄苓厷埩羰?，輪流加熱蠟?zāi)３尚涂蛩闹苓吙?，使緊貼其邊框內(nèi)側(cè)的石蠟熔化，取出成型的組織芯片石蠟塊。根據(jù)不同的研究目的，將組織芯片石蠟切片鋪于凈潔的或經(jīng)過其他特殊處理的載玻片上,繼續(xù)應(yīng)用于常規(guī)HE染色、免疫組織化學(xué)染色以及原位雜交等細(xì)胞學(xué)或分子生物學(xué)檢測。
實驗注意事項:
客戶提供:
1、實驗對象為組織樣品，取適量(250~500mg) 新鮮組織樣品或正確保存的組織樣品，加1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑，勻漿后抽提總蛋白。
2、實驗對象為細(xì)胞樣品，每份樣品取1x106 ~ 1x107細(xì)胞，PBS清洗細(xì)胞，去PBS加0. 1ml~1ml含蛋白酶抑制劑的總蛋白抽提試劑抽提總蛋白。
3、實驗對象為血清，則直接進(jìn)入步驟3。
交付標(biāo)準(zhǔn):
1、芯片檢測數(shù)據(jù)
2、完整的實驗操作規(guī)程、實驗報告(含軟件分析結(jié)果)以及實驗材料
服務(wù)優(yōu)勢
1、擁有專業(yè)病理診斷醫(yī)師進(jìn)行閱片，對原有診斷進(jìn)行確認(rèn)，并統(tǒng)--診斷標(biāo)準(zhǔn)。
2、做到切片及供體蠟塊雙標(biāo)記,確保組織采樣的準(zhǔn)確性。
3、采用高品質(zhì)進(jìn)口預(yù)制備受體蠟塊，點陣排列整齊美觀，并有多種規(guī)格可以選擇;進(jìn)口石蠟熱穩(wěn)定性佳，能確保組織芯與受體蠟塊結(jié)合緊密。
4、擁有專業(yè)的病理技術(shù)員進(jìn)行切片，每張切片不漏點跳點，終提供組織陣列完整的切片15套。
服務(wù)內(nèi)容(價格咨詢)
1、閱片服務(wù):專業(yè)病理診斷醫(yī)師進(jìn)行閱片,并同步完成取樣點標(biāo)記，30元/例。
2、組織芯片蠟塊制作
3、芯片蠟塊切片
4、兔疫組化染色
5、兔疫組化染色結(jié)果判讀
收費標(biāo)準(zhǔn)/服務(wù)周期/提供結(jié)果:
歡迎咨詢詳談，我們會根據(jù)您的方案及需求制定詳細(xì)的服務(wù)協(xié)議。
更多實驗技術(shù)服務(wù)請瀏覽網(wǎng)站其他內(nèi)容,或來電詳詢!
實驗代做服務(wù)：
ELISA試劑盒免費代檢測 | CCK8檢測 | 基因組DNA提取
| 蛋白相互作用分析 |
Western Blot
| 免疫組化 | 熒光定量PCR | 動物模型服務(wù) |
流式細(xì)胞檢測 | 細(xì)胞增殖 | 激光共聚焦 | DNA甲基化實驗 |
細(xì)胞劃痕 | 鈣離子濃度檢測 | 掃描電鏡實驗 | microRNA 測序 |
動物實驗 | Taqman探針 | ATP/ADP檢測
| 石蠟/冰凍切片 |
定點突變 | 線粒體膜電位(MMP)檢測 | 細(xì)胞生長曲線的測定 | 藥理毒理動物實驗
|
免疫共沉淀 | 真核表達(dá)載體構(gòu)建 | 染色質(zhì)免疫沉淀CHIP | 非標(biāo)定量（Label-free）實驗 |
執(zhí)照.jpg)
