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木質(zhì)素含量檢測(cè)試劑盒說明書

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木質(zhì)素含量檢測(cè)試劑盒說明書

微量法注意:正式測(cè)定之前選擇 2-3 個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。

規(guī)格:100T/96S

產(chǎn)品內(nèi)容:

試劑一:液體 34mL×1 瓶,4℃保存。每次用完用封口膜密封保存。

試劑二:液體 30mL×1 瓶,4℃保存。

標(biāo)準(zhǔn)品:粉劑×1支,50mg  木質(zhì)素,4℃保存。臨用前加入 1mL 高氯酸,充分混勻溶解,配成50m




g/mL 的標(biāo)準(zhǔn)液。

產(chǎn)品說明:


木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一,具有使細(xì)胞相連的作用。木質(zhì)素存在于木質(zhì)組織中,主要作用




是通過形成交織網(wǎng)來硬化細(xì)胞壁,為次生壁主要成分。




木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?;笤?nbsp;280nm 處有特征吸收峰,280nm 的吸光值高低與木質(zhì)素含關(guān)。

試驗(yàn)中所需的儀器和試劑:



紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、微量石英比色皿/96 孔 UV 板、可調(diào)式移液槍、研缽/勻漿




器、EP 管、封口膜、高氯酸、冰乙酸和蒸餾水。


操作步驟:

一、樣品處理:

樣品 80℃烘干至恒重,粉碎,過 40   目篩,稱取約 3mg 于 1.5mLEP 管中。

二、測(cè)定步驟:

1 、分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱 30min 以上,調(diào)節(jié)波長(zhǎng)至 280nm ,冰乙酸調(diào)零。

2 、操作表:在 1.5ml玻璃管中依次加入下列試劑:


測(cè)定管

標(biāo)準(zhǔn)管

空白管

樣品(mg)

3

-

-

試劑一 (µL)

300

300

300

高氯酸 (µL)

12

-

12

標(biāo)準(zhǔn)液 (µL)

-

12

-

封口膜密封,充分混勻。于 80℃水浴鍋水浴 40min ,進(jìn)行乙酰化。每隔 10min 震蕩一次,

然后自然冷卻。

試劑二 (µL)

300

300

300

充分混勻后于常溫 8000g 離心 10min ,取上清。

上清液 (µL)

12

12

12

 


冰乙酸 (µL)

588

588

588

測(cè)定 280nm 下的吸光值 A ,記為 A 測(cè)定管、A 空白管、A 標(biāo)準(zhǔn)管,計(jì)算△A=A 測(cè)定管-A空白管、△A 標(biāo)準(zhǔn)=A 標(biāo)準(zhǔn)管-A 空白管。

三、木質(zhì)素含量計(jì)算:

C 標(biāo)準(zhǔn)=C 原液×V 標(biāo)準(zhǔn)÷V 乙?;?/span>×V 上清÷V 檢測(cè)=0.0196 mg/mL

木質(zhì)素  = △A÷  (△A 標(biāo)準(zhǔn)÷C 標(biāo)準(zhǔn))×V 檢測(cè)÷(W×V 上清÷V 乙酰化)

= 0.5998×△A÷△A 標(biāo)準(zhǔn)÷W




C 標(biāo)準(zhǔn):標(biāo)準(zhǔn)液在最終檢測(cè)體系中的濃度,0.0196 mg/mL;C 原液:標(biāo)準(zhǔn)液濃度,50mg/mL;V標(biāo)準(zhǔn):加入的標(biāo)準(zhǔn)






液的體積,0.012mL;V 乙?;阂阴;磻?yīng)體積,0.612mL;V 上清:上清液體積,0.012mL;V 檢測(cè):檢





測(cè)反



應(yīng)總體積,0.6mL;W:樣本質(zhì)量,g。

注意事項(xiàng):

1 、試劑一有毒性,請(qǐng)操作時(shí)做好防護(hù)措施,加熱前必須用封口膜密封,以防氣體溢出。

2 、加熱過程中有劇烈反應(yīng),震蕩時(shí)輕搖,以免壓力過大噴出造成人身傷害。

3 、冰乙酸具有強(qiáng)刺激性,建議操作過程全部在通風(fēng)櫥內(nèi)操作。


4 、取上清加冰乙酸步驟根據(jù)自己樣品乙?;潭?,冰乙酸的用量可調(diào)整,保證吸光值在 0.1-0.8 之間即可,并




在公式中參與計(jì)算。

 

 本產(chǎn)品僅供科學(xué)研究使用!請(qǐng)勿用于臨床、診斷、食品、化妝品檢測(cè)等用途!

 

 

從2011年開始我們致力于在生命科學(xué)領(lǐng)域、生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技術(shù)及論文潤(rùn)色服務(wù),協(xié)助客戶各類實(shí)驗(yàn)服務(wù)及論文潤(rùn)色十余年,是客戶您值得信賴的科研合作伙伴!

如果您受時(shí)間、試驗(yàn)條件等限制而無法完成您的課題研究,歡迎您與我們聯(lián)系。

 

實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù):

 


 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 



滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

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