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牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)ELISA實(shí)驗(yàn)原理
點(diǎn)擊次數(shù):1697 更新時(shí)間:2011-10-18

牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)ELISA實(shí)驗(yàn)原理

本試劑僅供研究使用       目的:本試劑盒用于測(cè)定牛血清,血漿及相關(guān)液體樣本中偽狂犬病抗原(PRV Ag)水平。

實(shí)驗(yàn)原理:

  本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫法(ELISA)測(cè)定標(biāo)本中牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)。用純化的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體包被微孔板,制成固相抗體,可與樣品中偽狂犬病抗原(PRV Ag)相結(jié)合,經(jīng)洗滌除去未結(jié)合的抗體和其他成分后再與HRP標(biāo)記的偽狂犬病抗原(PRV Ag)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),與CUTOFF值相比較,從而判定標(biāo)本中牛偽狂犬病抗原(PRV Ag)的存在與否。

 

試劑盒組成:

試劑盒組成

48孔配置

96孔配置

保存

說(shuō)明書

1份

1份

 

封板膜

2片(48)

2片(96)

 

密封袋

1個(gè)

1個(gè)

 

酶標(biāo)包被板

1×48

1×96

2-8℃保存

陰性對(duì)照

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

陽(yáng)性對(duì)照

0.5ml×1瓶

0.5ml×1瓶

2-8℃保存

酶標(biāo)試劑

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

樣品稀釋液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑A液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

顯色劑B液

3 ml×1瓶

6 ml×1瓶

2-8℃保存

終止液

3ml×1瓶

6ml×1瓶

2-8℃保存

濃縮洗滌液

(20ml×20倍)×1瓶

(20ml×30倍)×1瓶

2-8℃保存

 

結(jié)果判定:

  試驗(yàn)有效性:陽(yáng)性對(duì)照孔平均值≥1.00; 陰性對(duì)照平均值≤0.10

  臨界值(CUT OFF)計(jì)算:臨界值=陰性對(duì)照孔平均值+0.15

  陰性判定:樣品OD值< 臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陰性

  陽(yáng)性判定:樣品OD值≥ 臨界值(CUT OFF)者為偽狂犬病抗原(PRV Ag)陽(yáng)性

注意事項(xiàng)

1.操作嚴(yán)格按照說(shuō)明書進(jìn)行,本試劑不同批號(hào)組分不得混用。

2.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。

3.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。

4.  封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。

5.底物請(qǐng)避光保存。

6.試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn),使用雙波長(zhǎng)檢測(cè)時(shí),參考波長(zhǎng)為630nm

7.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。終止液為2M的硫酸,使用時(shí)必須注意安全。

 

保存條件及有效期

1.試劑盒保存:2-8℃。

2.有效期:6個(gè)月

 

滬公網(wǎng)安備 31011802001678號(hào)

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