細胞分離液分離純化細胞操作
細胞分離液欄目主要提供淋巴細胞分離液、ficoll分離液以及多種細胞分離液試劑盒產(chǎn)品。
細胞分離液原理：
細胞分離液是一種包有乙烯吡咯烷酮的硅膠顆粒。滲透壓很低(<20mosm／kgH２O),粘度也很小，可形成高達1.3g／ml密度，采用預先形成的密度梯度時可在低離心力(200～1000g)于數(shù)分至數(shù)十分鐘內(nèi)達到滿意的細胞分離結(jié)果。由于Percoll擴散常數(shù)低，所形成的梯度十分穩(wěn)定。此外，Percoll不穿透生物膜，對細胞無毒害，因此廣泛用于分離細胞、亞細胞成分、細菌及病毒，還可將受損細胞及其碎片與完好的活細胞分離。
細胞分離液分離純化細胞舉例
1.富含NK活性大顆粒淋巴細胞(LGL)的純化:按順序由下向上逐層加50％、47.5％、45％、42.5％和40％五種不同密度的Percoll,如用10ml試管(或塑料管)分離,每層Percoll約1.2～1.5ml，初步從外周血中分離的PBMC細胞1×10８懸于１ml培基中，按要求裝樣、離心和取樣。一般富含NK殺傷活性的LGL細胞位于42.5％與45％Percoll界面以及上下二層的Percoll液中。
2.純化淋巴母細胞和除去死細胞：分別疊加50％和30％Percoll液。收取經(jīng)PHA(或其它抗原、有絲分裂原)刺激PBMC,或含有較高比例異型的PBMC(如腎綜合征出血熱患者)，按要求裝樣、離心和取樣。位于管底的淋巴細胞為小淋巴細胞；兩層Percoll之間為淋巴母細胞，純度和回收率在80％以上，位于30％Percoll表面是死細胞。收獲淋巴母細胞可進行表型、結(jié)構(gòu)以及功能的研究。
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